好多同学反馈对免疫沉淀与免疫共沉淀无法区分，选试剂找不到正规的平台，实验操作技巧没有掌握，实验无法正常安排，操作时长增加，耽误了实验进度。今天小编就为大家解读一下免疫沉淀与免疫共沉淀的区别和运用，让你的科研之路不再EMO。

“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的结合蛋白，进行小规模的蛋白质亲和纯化的实验。将蛋白通过微珠（纯化介质）进行富集。免疫沉淀根据检测的目的可以分为免疫沉淀、免疫共沉淀(Co-IP)、染色质免疫沉淀(ChIP)和RNA免疫沉淀(RIP)。

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免疫共沉淀分析(Co-IP)是免疫沉淀的延伸，基本的技术都是采用目标抗原特异性的固相化抗体；但IP的目标是纯化单一抗原，而Co-IP旨在分离抗原及与抗原结合的蛋白质或配体，主要用于蛋白-蛋白相互作用检测。如果样品溶液中存在与靶蛋白相互作用的目的蛋白,也会被一同捕获及纯化得到,通过SDS-PAGE、Western和质谱等方法鉴定与靶蛋白结合的蛋白。

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染色质免疫沉淀(ChIP)用于鉴定基因组中与靶蛋白(如转录因子和组蛋白)结合的区域。将蛋白质与DNA暂时交联固定并剪切DNA,目标蛋白与核酸序列一起被沉淀后通过高通量测序、Southern和PCR等方法进行DNA鉴定。确定与靶蛋白结合的DNA片段。

RNA免疫沉淀(RIP)原理与ChIP相似,与靶蛋白结合的RNA被沉淀后,用高通量测序、RT-PCR或Northern等方法对沉淀进行RNA鉴定。

随着技术的发展,目前磁性微粒已经取代琼脂糖成为免疫沉淀的首选方法,由于磁性微粒明显小于琼脂糖,因此可以与更多的抗体结合,纯化是可以使用磁力架进行,避免了离心分离可能导致的抗原-抗体结合的破坏,避免了检测目的的损失。

上述各种免疫沉淀的异同总结如下:

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