干货分享|超全重组蛋白使用指南
近期Abbkine上新一批经过严格验证的活性细胞因子重组蛋白，很多小伙伴在咨询重组蛋白的使用注意事项和保存方法。这不，它来咯~
Abbkine重组蛋白均为冻干粉形式，-20 ℃或-80 ℃可以保存数年。蛋白冻干粉在使用前需溶解，部分重组蛋白产品带有复溶buffer，优先推荐使用配套的复溶buffer。不同重组蛋白复溶及储存条件可能会存在差异，详细参考说明书推荐方法。
溶解方式
打开试管前务必对产品进行离心。10000-12000 rpm离心30 s或3000-3500 rpm离心5 min。建议将冻干后的蛋白在无菌无内毒素的ddH2O中复溶至0.1-1 mg/mL，期间可用枪轻轻吹打混匀，室温静置至少20 min，使其完全溶解。注意避免剧烈涡旋。
如何使用
建议首先按照说明书指导对冻干粉按照一定的浓度进行复溶，完全复溶后，再根据实际实验所需浓度，使用特定的稀释液进行稀释。
如何保存
冻干粉形式：冻干粉形式的重组蛋白通常较为稳定，-20℃或-80℃可以长期保存。复溶后液体形式：复溶后的重组蛋白4℃可以保存1周。
复溶液的长期保存：
由于Abbkine重组蛋白冻干液成分及复溶buffer均不含蛋白保护剂，溶解后的蛋白溶液如需长期保存，建议添加载体蛋白（5% HSA, 10%FBS或0.1%BSA)后，分装保存，避免反复冻融。
常见问答
Q: 为何一定要开盖前离心？
A: 打开试管前务必进行离心，Abbkine重组蛋白不含载体蛋白或其他添加剂（如HSA、BSA或蔗糖、甘露醇、海藻糖等），通常以最少量的盐溶液冻干处理后盛放于无菌管内。微量的蛋白在冻干过程中会沉积在管壁内，形成很薄或不可见的蛋白膜，冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而飘散并粘附于管壁或管盖上，因此开盖前需离心将冻干粉收集到管底，以减少冻干粉的开盖损失，确保溶解蛋白的正确浓度。
Q: 为何不能直接将蛋白稀释至实验所需浓度，还要先复溶？
A: 说明书建议的复溶buffer是溶解冻干粉的最佳条件，直接稀释可能会存在不溶的情况。蛋白在一定的浓度范围内可以保持良好的活性及稳定性。低于或高于该浓度范围，可能会导致蛋白无法完全溶解，甚至出现蛋白质聚集现象，或是活性减弱甚至丧失。
Q: 为何有时冻干粉不易溶解？
A: 蛋白的溶解性与很多因素有关，如pH值和离子强度等，说明书上推荐的复溶buffer均经过严格测试，是能够将该活性蛋白完全溶解的液体。若难以立即溶解，可以室温静置20 min，使其完全溶解，或将其放置于水平摇床上低速摇一段时间，或是将重悬液在4℃静置2小时以上。
Q: 能否使用涡旋仪剧烈震荡，帮助蛋白快速溶解呢？
A: 切忌使用涡旋仪进行快速振荡。一般用移液枪的枪头轻吹几下，即可使重组蛋白完全溶解。如不易溶解，应考虑其它因素，尝试使用其它方式促进溶解。
Q: 重组蛋白中是否含有防腐剂？
A: Abbkine重组蛋白均为无菌级别且不含防腐剂，使用过程中注意避免微生物污染。建议使用灭菌溶液复溶，使用无菌管子进行分装保存，避免多次使用交叉污染。
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赋能细胞研究与治疗 Enabling cell research and therapy
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