细胞培养实验是众多细胞检测分析实验的基础，也是重中之重，科研宝子们在培养细胞的过程痛并快乐着，真可谓“细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋”。

   小编曾经也是实验室未能幸免的一份子，为了测定一批细胞指标熬夜通宵查文献，好不容易从成千上万的文献海洋中成功上岸，可是这还不算完，紧接着订购各种化学试剂、摸索实验条件、优化培养体系，历经千磨万难，可算是盼到上岸的希望了，可到了即将检测的时候，细胞又活力降低了，细胞污染了，细胞生长速度慢了，无从分析，该怎么办呢？

别急，办法总比困难多！现在文献有人帮你查了，各种细胞培养试剂也给配齐，摸索实验条件、优化培养体系，这些小事完全不需要您大材小用耗费宝贵的时间。对的，这就是Abbkine的细胞培养系列，为您的细胞培养实验排忧解难、保驾护航。您需要做的就是按图索骥，好好享受实验一气呵成的快感！

细胞培养实验需要准备的试剂耗材有哪些呢？

细胞培养的一般过程有哪些呢？

1. 准备工作：准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。

2. 取材：在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定)，经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中，这一过程称为取材。

3. 培养：将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。

4. 冻存及复苏：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。

常见的几种培养基有哪些呢？

细胞消化要注意哪些方法呢？

1、消化时间：掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤。

2、消化浓度：掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

Abbkine重磅推出的温和型干细胞消化液（BMC1060，Accutase Stem Cell Detach Solution）具有明显优势特点：

1）重组胰酶生产，无动物源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源性原料，适用于一些严格要求使用无动物源性胰酶消化液的干细胞消化，也适用于其他贴壁培养的哺乳动物细胞消化；

2）温和有效的消化干细胞，损伤较传统胰酶更低，可提高细胞的活率，消除因过度消化对细胞后期传代带来的不利影响。该消化液经过过滤除菌处理，含EDTA，不含酚红，pH 值为 7.2-7.4。

细胞冻存与复苏

细胞冻存与复苏是一种用于长期储存细胞的技术。在这个过程中，细胞被置于低温环境中，减缓其代谢活动。通过将细胞冷冻保存在液氮中（通常为-196℃），细胞暂时脱离生长状态，但其细胞特性得以保存。当需要时，可以通过复苏将这些冻存的细胞重新激活，以供实验使用。这种方法能够适度地保存一定数量的细胞，防止细胞受到污染或其他意外事件的影响，从而发挥了细胞保种的作用。

缓慢冷冻的过程可以逐渐使细胞脱水，以防止细胞内形成大冰晶。因为大冰晶可能导致细胞膜和细胞器的损伤和破裂。而快速复苏的目的是防止小冰晶再次结合成大冰晶，即防止冰晶的再结晶过程。Abbkine的SuperKine™ 快速细胞冻存液（无血清/无蛋白）可以从成分根本上达到“快冻快融”的效果，避免小冰晶的形成。

小编也在闲暇之余为大家整理了许多细胞培养实验的干货知识，为宝子们的细胞保驾护航：

Q1：一般在拿到细胞后，应该注意什么？

A1：1.收到细胞先不开盖，静置并观察拍照；

2.观察细胞密度，适度培养或者传代；

3.细胞消化液用PBS配制，慎用Hanks液配制。

Q2：可否使用与原先培养条件不同的培养基？

A2：不建议。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供的培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活

Q3：何时须更换培养基？

A3：视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。

Q4：培养基中是否须添加抗生素？

A4：正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素，为避免污染可适当添加双抗（BMC1030）

Q5：如何根据 STR 数据判断细胞系的身份？

A5：参考数据库进行比对,一般说来，匹配度≥80%即可认为该细胞系正确，匹配度＜80%则说明该细胞系的来源需要被怀疑。

如果细胞系被鉴定出发生交叉污染或错误标记，则需要拿更早代数的细胞进行鉴定，从而找到问题的起源或者直接从可靠的机构购买一株新的细胞系。

Q6：国内有类似的 STR 标准数据库吗？

A6：有的，这个是协和医院官方建立的一个国家实验细胞资源共享平台，http://www.cellresource.cn / 在里面约会收录一些国内自主建系的细胞的标准序列。

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