背景 | Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)是通过测量Caspase 3/7的活性而用于细胞凋亡检测的。因为Caspase 3 (CPP32/ Apopain)在细胞凋亡的起始过程中发挥着重要作用,因此其作为细胞凋亡指示剂广泛地被大家所接受。Caspase 3具有特异性的底物多肽识别序列,即天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)。Caspase 3/7 Green采用Caspase 3/7识别序列(DEVD)偶联到高亲和力的DNA荧光染料,具有细胞膜通透性,能够穿透细胞膜进入细胞质中,Caspase 3/7 Green试剂本身无荧光,并与DNA具有电荷排斥效应;当细胞发生凋亡时,Caspase 3/7 Green作为底物被激活的Caspase 3/7切割后释放出高亲和力的DNA染料,与DNA结合后产生强荧光(Ex /Em : 488 nm /525 nm,流式推荐FITC通道)。当细胞进入凋亡晚期或坏死时细胞膜完整性丧失,4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(4',6-Diamidino-2-Phenylindole, DAPI)可进入凋亡晚期和坏死细胞的细胞中,与双链DNA特异性结合并产生强烈的蓝色荧光(Ex /Em : 358nm/461 nm),与Caspase 3/7 Green搭配使用,可同时区分坏死细胞及凋亡细胞中Caspase 3/7酶的活性。 |