产品英文名称 | LinKine™ HRP Labeling Kit |
产品中文名称 | LinKine™ 辣根过氧化物酶偶联试剂盒 |
别名 | Horseradish peroxidase; HRP |
试剂盒组分 | • 活化的 HRP 偶联物溶液 • HRP 偶联缓冲溶液 • HRP 淬灭剂 |
特点&优势 | • 活化的HRP - 高碘酸盐处理、醛活化的辣根过氧化物酶,可直接偶联到抗体或者蛋白质的伯胺位点(例如,赖氨酸)上。 • 高活性HRP – 酶活性可达 120-200 units/mg;活化的酶在-20℃条件下至少稳定保存12个月。 • 灵活用量 – 每1毫克量的活化酶就足以与1毫克的IgG反应。 • 定制化 –改变摩尔比,反应缓冲液和pH值,以及其它参数,可实现不同水平的HRP偶联。 |
使用中注意事项 | • 待偶联的抗体最好溶解于无氨的缓冲液中(如:MES、MOPS、HEPES、PBS),浓度为10-50 mM,pH为6.5-8.5。 • 常用的非缓冲盐(如氯化钠),螯合剂(如EDTA)和糖对偶联效率没有影响。 我们不建议在叠氮化钠存在下进行HRP偶联,或者向HRP结合的抗体中加入叠氮化钠。甘油浓度即使高达50%也不对偶联效率产生干扰。 • 抗体用于标记的理想摩尔比为,抗体:HRP = 1:4 到 1:1之间 。 • 浓度在0.5-4 mg/ml内的抗体,通常偶联效果最佳。 |
保存建议 | 该试剂盒在4℃条件下可保存6个月。 |
运输条件 | 蓝冰运输 |
警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
背景 | 活化的辣根过氧化物酶(HRP),其天然碳水化合物(糖)已被高碘酸盐轻度氧化以产生胺反应性醛基。 活化的过氧化物酶的羰基自发地、有效地与抗体或其它蛋白质上的伯胺交联。该方法比其它胺反应性化学试剂,如戊二醛偶联更有效,戊二醛偶联常常导致聚合反应和更高程度的偶联失活。 预活化的酶消除了从头开始制备和验证活化的过氧化物酶所固有的困难。 |
Fig. LinKine™ HRP Labeling Kit is designed for preparing HRP conjugates directly from proteins, peptides, and other ligands that contain free amino groups.
是的。
quencher powder即为终止液,作用是封闭游离HRP的反应基团。
Abbkine HRP偶联试剂盒在设计时,已经考虑到这点。试剂盒可在反应结束时提供低水平的游离HRP。因此,不需要过滤步骤。试剂盒中提供的终止液会封闭游离HRP的反应基团。
一次标记100ug蛋白,建议选用100ug或3x100ug规格的试剂盒进行偶联,避免材料的浪费。
如果偶联的是普通一抗,可以通过直接法ELISA进行验证;如果是偶联二抗,可以通过间接法ELISA进行验证。如果是偶联蛋白抗原,可以用双抗原夹心法ELISA进行验证。
该试剂的作用是调节偶联反应液的PH值。
作者: Lei L, Ji M, Yang J 杂志名称:Frontiers in Immunology IF:9