产品英文名称 | LinKine™ HRP Labeling Kit |
产品中文名称 | LinKine™ 辣根过氧化物酶偶联试剂盒 |
试剂盒组分 | • 活化的 HRP 偶联物溶液 • HRP 偶联缓冲溶液 • HRP 淬灭剂 |
特点&优势 | • 活化的HRP - 高碘酸盐处理、醛活化的辣根过氧化物酶,可直接偶联到抗体或者蛋白质的伯胺位点(例如,赖氨酸)上。 • 高活性HRP – 酶活性可达 120-200 units/mg;活化的酶在-20℃条件下至少稳定保存12个月。 • 灵活用量 – 每1毫克量的活化酶就足以与1毫克的IgG反应。 • 定制化 –改变摩尔比,反应缓冲液和pH值,以及其它参数,可实现不同水平的HRP偶联。 |
使用中注意事项 | • 待偶联的抗体最好溶解于无氨的缓冲液中(如:MES、MOPS、HEPES、PBS),浓度为10-50 mM,pH为6.5-8.5。 • 常用的非缓冲盐(如氯化钠),螯合剂(如EDTA)和糖对偶联效率没有影响。 我们不建议在叠氮化钠存在下进行HRP偶联,或者向HRP结合的抗体中加入叠氮化钠。甘油浓度即使高达50%也不对偶联效率产生干扰。 • 抗体用于标记的理想摩尔比为,抗体:HRP = 1:4 到 1:1之间 。 • 浓度在0.5-4 mg/ml内的抗体,通常偶联效果最佳。 |
保存建议 | 该试剂盒在4℃条件下可保存6个月。 |
运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
背景 | 碱性磷酸酶(ALP或AKP)是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。碱性磷酸酶是磷酸酶的一种,但它不是单一的酶,而是一组同功酶。碱性磷酸酶可以与待标记分子结合,当与适当的底物一起孵育时,会生成带有颜色,荧光或发光衍生物的标记分子偶联体,我们可以对其进行检测和定量分析。AP通常用于偶联物中,以确定分子靶标的存在,常用于ELISA、蛋白质免疫印迹和和免疫组织化学等实验。由于较高浓度的无机磷可竞争性地抑制碱性磷酸酶的活性,所以在免疫实验中不能用含磷酸根丰富的PBS等体系,否则会造成本底偏高,可以用TBS等不含磷酸根的体系。 |
Fig. LinKine™ HRP Labeling Kit is designed for preparing HRP conjugates directly from proteins, peptides, and other ligands that contain free amino groups.
是的。
quencher powder即为终止液,作用是封闭游离HRP的反应基团。
Abbkine HRP偶联试剂盒在设计时,已经考虑到这点。试剂盒可在反应结束时提供低水平的游离HRP。因此,不需要过滤步骤。试剂盒中提供的终止液会封闭游离HRP的反应基团。
一次标记100ug蛋白,建议选用100ug或3x100ug规格的试剂盒进行偶联,避免材料的浪费。
如果偶联的是普通一抗,可以通过直接法ELISA进行验证;如果是偶联二抗,可以通过间接法ELISA进行验证。如果是偶联蛋白抗原,可以用双抗原夹心法ELISA进行验证。
该试剂的作用是调节偶联反应液的PH值。
作者: Lei L, Ji M, Yang J 杂志名称:Frontiers in Immunology IF:9