| 产品英文名称 | CheKine™ Micro Coenzyme Ⅱ NADP(H) Assay Kit |
| 产品中文名称 | CheKine™ 辅酶Ⅱ NADP(H）含量检测试剂盒（微量法） |
| 别名 | NADP检测,NADPH 检测,NADP/NADPH 检测试剂盒,NADP,NADPH, NADP/NADPH |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • 实验缓冲液 • 葡萄糖 (1 M) • WST-8溶液 • Enhancer增强剂 • NADP酶循环反应混合物 • NADPH标准品 (10 mM) • NADP提取缓冲液 • NADPH提取缓冲液 |
| 特点&优势 | • 检测细胞或组织提取物、细菌中 NADP+/NADPH 的浓度以及比值。 • 线性的检测范围：0.1-4 µM NADP+/NADPH |
| 使用中注意事项 | •快速加入工作试剂应该很快，混合彻底。 •以下物质会干扰，应避免样品制备。 EDTA（> 0.5mM），抗坏血酸，SDS（> 0.2％），叠氮化钠，NP-40（> 1％）和吐温-20（> 1％）。 |
| 保存建议 | 建议收到货后避光保存于-20°C，有效期为6个月。请参考说明书中各个组分的最佳保存条件进行储存。 |
| 运输条件 | 蓝冰运输 |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 背景 | 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）是参与许多氧化还原反应的酶促辅因子，其在还原（NADPH）和氧化（NADP）形式之间循环。NADP还参与生物合成反应，例如脂质和核酸合成，其中它起还原剂的作用。磷酸戊糖途径（PPP）的氧化分支是动物细胞中产生的NADPH的主要来源。对监测其浓度水平持续存在兴趣。NADP + / NADPH的定量测定在与细胞或组织的能量转化和氧化还原状态有关的研究中具有应用。 |
Fig. Standard Curve of NADPH in 96-well plate assay. The y-axis is ΔOD and the x-axis is NADPH concentration (uM).
匀浆样本不是直接用枪头吹打混匀，而是用Dounce 均质器，或超声破碎，进行匀浆。
加样应迅速、麻利，工作液加热并混匀之后应迅速进行0 min检测，保证其为未反应时的数值。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。
60℃水浴加热5分钟后，样品中未被提取的组分就会分解而只保留目标提取物。
建议60摄氏度水浴中进行反应，因为水的比热容比较大，易于让反应温度保持在60摄氏度，比较恒定。
这个实验不需要设置空白孔，0min的OD值可以做自身背景值的调零。所以不用设置空白孔。
是的，提取物离心需要在四度条件下低温进行。
超声粉碎：用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用40安培，5秒/次，间隙10秒反复3~5次。
植物组织会变黄，动物样本一般不变黄。
这2种提取液一种是酸一种是碱，他们相互中和。
PBS至少清洗一遍，离心后，弃掉上清。
Slope表示斜率，n表示稀释因子。
原理：NADP + / NADPH检测试剂盒基于葡萄糖脱氢酶循环反应，在这一反应过程中生成的NADPH将MTT还原生成formazan，在565nm左右检测有最大吸收峰。反应体系中生成的formazan与样品中总的NADP+或NADPH的总量呈正比关系。实验过程中需将样本平均分成两份，分别提取NADP和NADPH。
是的。
是的。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。
不存在，因为该试剂盒的样本前处理步骤中已经这两种物质分别进行了提取，再分别进行检测，所以不存在两种检测物之间的转化。
样本中NADPH和NADP的含量的计算都可以通过这一个标准曲线进行计算。它们的浓度和吸光度关系是相同标准的。
作者：Qian Dai, Di Zhang, et al 杂志名称：Medicine Science Monitor IF：1
作者：Pragati Singh, Mohammad Irshad Reza , Anees A Syed 杂志名称：Life Sci IF：4
作者：Mohammad Irshad Reza , Anees A Syed 杂志名称：Life Sci IF：4
作者：Z Liu, M Huang, H Chen, X Lu, Y Tian, P Hu 杂志名称：Bioresource Technology IF：11
作者：F Xiaoli, Z Yaqing, L Ruhui, L Xuan, C Aijie 杂志名称：Journal of Hazardous IF：4
作者：Long Y, Qiu J, Zhang B, He P, Shi X, He Q, Chen Z, Shen W, Li Z, Zhang X, 杂志名称：Front Pharmacol IF：4
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