| 产品英文名称 | ExKine™ Mitochondrion Extraction Kit (Tissue) |
| 产品中文名称 | ExKine™ 线粒体分离提取试剂盒（组织样品） |
| 试剂盒组分 | • 裂解缓冲液 A (5×) • 裂解缓冲液 B (5×) • 保存缓冲液 |
| 特点&优势 | • 从动物软组织和硬组织中分离提取完整的线粒体。 • 分离的线粒体几乎与任何下游应用兼容。 |
| 使用中注意事项 | 所有实验步骤请在2-8°C下执行。使用预冷的缓冲液和设备，并确保所有溶液都是解冻和均匀的。 |
| 保存建议 | 请参阅说明书中各个组分的存储条件。自发货之日起，在推荐温度下至少稳定12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 背景 | 线粒体是一种双膜结合的细胞器，存在于大多数真核细胞中。线粒体的功能是提供细胞能量。此外，线粒体参与其他任务，如信号传递、细胞分化和细胞死亡，以及维持对细胞周期和细胞生长的控制。线粒体与多种人类疾病有牵连，包括线粒体疾病、心脏疾病、心力衰竭和孤独症。线粒体可能在这些细胞过程中发挥重要作用。 |
Fig. Mouse liver tissues were extracted with ExKine™ Mitochondrion Extraction Kit (Tissue). Mitochondrial (M) and Cytosolic (C) fractions were analyzed by WB using cytochrome c antibody (cat#ABM40191) and VDAC1 antibody (cat#ABP53121).
建议用不加酚红的，这里的trypsin是用于坚硬组织的软化，消化细胞的胰酶中的酚红的作用其实主要是起到PH指示剂的作用，该试剂盒实验不需要酚红进行指示，所以应选不含酚红的胰酶。
对于 100 mg质地较硬的组织（如胃组织，骨骼肌组织），用0.25 mg/mL胰蛋白酶冰上消化 5-10 min（孵育时间因不同组织而不同），用 1 mL冰冷的裂解液B洗涤样品一次，移除上清液，加入新鲜冰冷的 1 mL裂解液B，将样本转移至预冷的 Dounce 匀浆器并于冰上匀浆样本（通常为 20-30 次研磨）。如有疑问，请联系support@abbkine.com。
使用新鲜的动物组织，通常要求动物处死后不超过一小时，并且保存在冰上的组织。请勿使用经过冷冻保存的组织。
使用混合蛋白酶抑制剂比较合适，推荐Abbkine的BMP1001蛋白酶抑制剂（100X），该抑制剂是一种通用型的蛋白酶抑制剂，效果很好。
建议按照说明书中硬组织的处理方法用胰酶进行组织消化，然后在冰上研磨。
本试剂盒提取的线粒体通常可以应用于较多实验研究，如线粒体呼吸、线粒体膜电位、细胞凋亡、mtDNA和mtRNA以及线粒体蛋白组等。
因为组织样本较容易破碎，手动匀浆即可。如使用组织匀浆机等机械匀浆法，很难把控力度，可能会造成线粒体损伤，因此不建议使用。
作者：L Li, Y Yao, J Zhao 杂志名称：International Journal of Obesity IF：
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