商品信息

产品英文名称	CheKine™ Micro Lactate Assay Kit
产品中文名称	CheKine™ 乳酸检测试剂盒（微量法）
别名	乳酸,乳酸检测,乳酸检测试剂盒,Lactate

商品属性

检测方法	比色法
试剂盒组分	• 实验缓冲液 • 乳酸脱氢酶 • 乳酸脱氢酶辅助因子 • WST-8 • 增强剂 • L (+) -Lactate 标准品 (100 mM)
特点&优势	• 测定血清，血浆，动物组织/细胞样本，植物组织、尿液和其他生物液体中L (+) - Lactate的含量。 • 检测范围：0.03 mM-2 mM。 • 不需要对样品进行预处理或纯化。 • 使用WST-8作为底物，比MTT更灵敏。
使用中注意事项	• 如果不立即检测，样品可以在-80℃保存一个月。 •建议对样品设置几个稀释度，以确保读数在标准值范围内。 •为保证实验效果，使用新鲜样本是必要的。如果不同时进行测定，最好在存储样品之前完成样品制备。
保存建议	储存在-20°C，收到后立即避光保存。 试剂盒收到后的存储为6个月。 请参阅说明书上各个组件的存储条件。
运输条件	蓝冰运输
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

附加信息

背景	乳酸(CH3CH(OH)COO-)是动物体内通过乳酸脱氢酶的作用而形成的代谢化合物，是在无氧条件下（如运动时），在增殖细胞中产生的。异常高浓度的乳酸与癌症、糖尿病和乳酸酸中毒等病理条件有关。L(+)-乳酸是在人体中间代谢过程中形成的主要乳酸立体异构体，在血液中以1-2 mmol/L左右的水平存在。D(-)-乳酸也可在血液中发现，但浓度仅为L(+)-乳酸浓度的1-5%左右。

图片及说明

样本制备
注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。
1. 动植物组织：将组织按 1 mL/0.1 g 的比例用 Lactate Assay Buffer 冰浴匀浆，12,000 g，4℃离心5 min，取上清液，置冰上待测。
2. 细胞：收集细胞到离心管内，用冷的 PBS 清洗细胞，离心后弃上清，将细胞按 1 mL/500 万的比例用Lactate Assay Buffer 冰浴超声波破碎 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30 次），然后 12,000 g，4℃离心5 min，取上清液，置冰上待测。
3. 血清、血浆等液体样本：直接测定。
注意：
（1）细胞或组织提取物中的 NADH 或 NADPH 会产生乳酸测定的背景，为了去除 NADH 或NADPH 背景，同样数量的样品可以在没有乳酸脱氢酶的情况下进行检测，然后从乳酸读数中减去背景读数。
（2）内源性乳酸脱氢酶（LDH）可降解乳酸。含有LDH（如细胞培养液、细胞或组织裂解液等）的样品应通过 10 kDa MW 旋转过滤器过滤（12,000 g，4℃离心10 min，具体过滤步骤以过滤器的说明书为准），以去除所有蛋白质，取滤液进行检测，然后-80℃保存。
（3）如需测定蛋白浓度，推荐使用Abbkine货号：KTD3001 的蛋白质定量试剂盒（BCA 法）进行样本蛋白质浓度测定。

• 如果客户样本不能在同一天收集检测，会间隔几天，该样品是Lactate Assay Buffer处理过后冻在-80度吗？

  可以。

• 乳酸检测试剂盒可以检测细胞培养液里的乳酸含量吗？

  可以，但是需要把细胞给分离出来，单独取定量的细胞培养液进行检测。

• 该试剂盒是否可以测乳酸生成？

  可以测，建议分别取生化反应前后的样本，并分别进行检测，计算乳酸含量变化的差值。

• 该试剂盒里面有一个操作是需要去除所有蛋白质，该需要怎么做？

  需要，用过滤除杂的方法，内源性乳酸脱氢酶（LDH）可降解乳酸。含有LDH （如培养基或组织裂解液）的样品应通过10 kDa MW旋转过滤器过滤，以去除所有蛋白质，然后-80°C 保存。

• 该试剂盒检测细胞培养液的前处理的方法是什么？

  以2000g的速度离心5min，取0.5-10 µL上清液可直接用Lactate Assay Buffer稀释到50 µL/孔进行检测。

• 本试剂盒中检测OD0 min的意义是什么？设置OD30 min-OD0 min的作用是什么？

  本试剂盒的OD0 min是指样本溶液中可能存在背景OD值，OD30 min-OD 0min的作用是将检测结果减去背景OD值，消除实验背景。

• 该乳酸检测试剂盒加完buffer之后是颠倒混匀，还是要用移液器吹打混匀呢？

  离心管里面要用斡旋仪斡旋10s。

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